液相色譜柱關(guān)于尺寸的選擇說(shuō)明

　　
　　
　　現(xiàn)代液相色譜分析中，色譜柱的選擇直接影響了分離效果的好壞，選擇合適的色譜柱可以縮短方法開(kāi)發(fā)所需的時(shí)間，并且使方法更具穩(wěn)定性。但是現(xiàn)在市場(chǎng)上色譜柱種類(lèi)繁多，不同類(lèi)型的色譜柱分離對(duì)象不同，因此，要做合適的選擇，必須對(duì)此有一定的認(rèn)識(shí)和了解。
　　
　　液相色譜柱根據(jù)功能分為HPLC和UHPLC、UPLC柱，根據(jù)內(nèi)徑大小又有常規(guī)分析柱，窄徑柱和毛細(xì)管柱的類(lèi)型區(qū)別，其中應(yīng)用廣泛的液質(zhì)聯(lián)用儀就是用的窄徑柱。因?yàn)榉治鲱?lèi)的儀器主要致力于對(duì)樣品成分的判斷，就需要能夠準(zhǔn)確分離少量樣品的內(nèi)徑較小的色譜柱。而內(nèi)徑孔大的色譜柱用于進(jìn)樣量大的成品純化和分離。
　　
　　液相色譜柱尺寸選擇：
　　
　　較長(zhǎng)的液相色譜柱組分保留較強(qiáng)，運(yùn)行時(shí)間較長(zhǎng)，柱效更高，分離度效果更好。在實(shí)際工作中應(yīng)綜合衡量運(yùn)行時(shí)間和柱效，選擇長(zhǎng)度適宜的色譜柱。例如含量測(cè)定、溶出檢測(cè)對(duì)于分離的要求較低，可選用較短的液相色譜柱，減少運(yùn)行時(shí)間；有關(guān)物質(zhì)一般選擇較長(zhǎng)的色譜柱，提高分離效果。
　　
　　內(nèi)徑小的色譜柱靈敏度較高，峰型更窄，但是載樣量較小。如果載樣量滿足要求，需要更高更尖銳的峰提高靈敏度，可以選擇更小內(nèi)徑。但是如果進(jìn)樣量超過(guò)了柱載樣量，色譜峰將極大變寬。所以應(yīng)在靈敏度和載樣量之間綜合衡量。
　　
　　粒徑小的色譜柱分離度較好，色譜柱壓力更大。如果5μm粒徑的色譜柱分離度稍有不足，則同型號(hào)3μm色譜柱的分離度一般會(huì)提供令人滿意的選擇性。
　　
　　如果選擇較小尺寸的液相色譜柱，應(yīng)衡量柱外死體積對(duì)柱效的影響，柱外死體積包括連接管線、進(jìn)樣體積、色譜柱接頭與色譜柱連接處的空隙等。所以一般超液相使用的色譜柱不適用于常規(guī)液相儀。小規(guī)格色譜柱使用同一品牌的儀器，減少連接處空隙引入的死體積。